分子量与拷贝数换算

dsDNA 按 660 Da/bp、ssDNA 330 Da/nt、RNA 340 Da/nt 估算（也可用下方精算公式）。

精算公式：dsDNA 分子量 ≈ 650×bp（A/T 与 G/C 平均）；寡核苷酸分子量 = Σ(单核苷酸残基质量) − 61.96（详见「序列工具箱」）。

引物 Tm 与退火温度

采用 SantaLucia (1998) 最近邻热力学模型，含 Na⁺ 盐浓度与引物浓度校正。

建议退火温度（Ta）≈ 最近邻 Tm − 5 °C，梯度 PCR 时可在此值 ±3 °C 范围内摸索。若含 Mg²⁺ 或变性剂，实际 Tm 会升高/降低。

序列工具箱

反向互补、转录、翻译、GC 含量、分子量一次搞定（自动忽略空格/数字/FASTA 头）。

PCR 反应体系（Master Mix）计算

填写单反应体积，设置反应数与损耗余量，自动给出各组分总量并区分「混合液」与「单独添加」。

勾选「单独添加」的组分（如模板、ddH₂O 补水）不计入混合液，按每反应单独移液更准确；混合液配制后按每反应体积分装，最后加入模板。

稀释与溶液配制

三件套：母液稀释（C₁V₁=C₂V₂）、称量配制、系列稀释。

细胞计数（血球计数板）

Neubauer 计数板：1 大格 = 1 mm² × 0.1 mm 深 = 1×10⁻⁴ mL，故浓度 = 平均每大格细胞数 × 10⁴ × 稀释倍数。

蛋白浓度（A280）

两种方式：粘贴序列自动算摩尔消光系数，或手动输入 ε / E1%。

ε₂₈₀ 估算：n(Trp)×5500 + n(Tyr)×1490 + n(胱氨酸)×125；A280(1 mg/mL) = ε / MW。若无 Trp/Tyr/Cys，A280 无法用于定量，建议改用 BCA / Bradford。

离心 RPM ↔ RCF 换算

RCF = 1.118×10⁻⁵ × r(cm) × rpm²，r 为转子中心到离心管底/样品中部的半径。

同一 RPM 在不同转子上 RCF 差别很大，记录离心条件时请务必写 ×g。

qPCR 标准曲线与扩增效率

每行填「模板量（拷贝数或相对稀释） , Ct」。斜率 −3.32 ≈ 100% 效率；效率 E = 10^(−1/斜率) − 1。

单位换算

质量、体积、摩尔、浓度、长度（含 bp↔nm）常用单位互转。

参考速查表

密码子表、氨基酸表、常用缓冲液配方。